Syraproteas
  • SyraproteasSyraproteas

Syraproteas

Detta syraproteas används för att bestämma den proteolytiska aktiviteten, uttryckt som hemoglobinenheter på tyrosinbasen (HUT).

skicka förfrågan    PDF nedladdning

produkt beskrivning


Tillämpning och princip

Detta syraproteas används för att bestämma den proteolytiska aktiviteten, uttryckt som hemoglobinenheter på tyrosinbasis (HUT), av beredningar härledda från Aspergillus oryzae var och Aspergillus niger var, och det kan användas för att bestämma aktiviteten hos andra proteaser vid pH 4,7 . Testet baseras på 30 minuters enzymatisk hydrolys av ett hemoglobinsubstrat vid pH 4,7 och 40 °. Ohydrolyserat substrat fälls ut med triklorättiksyra och avlägsnas genom filtrering. Mängden solubiliserat hemoglobin i filtratet bestäms spektrofotometriskt.


Reagenser och lösningar av syraproteas
Hemoglobin Använd hemoglobinsubstratpulver (Sigma Chemical Co., katalognummer H2625) eller liknande högkvalitativt material som är helt lösligt i vatten.
Acetatbuffertlösning Lös upp 136 g natriumacetat (NaC2H3O2 · 3H2O) i tillräckligt med vatten för att göra 500 ml. Blanda 25,0 ml av denna lösning med 50,0 ml 1 M ättiksyra, späd till 1000 ml med vatten och blanda. PH för denna lösning bör vara 4,7 ± 0,02.
Substratlösning Överför 4,0 g av hemoglobinet till en 250 ml bägare, tillsätt 100 ml vatten och rör om i 10 minuter för att lösa sig. Sänk ner elektroderna i en pH-mätare i lösningen och justera pH-värdet till 1,7 genom att tillsätta 0,3 N saltsyra under kontinuerlig omrörning. Efter 10 minuter justerar du pH till 4,7 genom att tillsätta 0,5 M natriumacetat. Överför lösningen till en 200 ml mätkolv, späd till vatten med vatten och blanda. Denna lösning är stabil i cirka 5 dagar när den kyls.
Triklorättiksyra-lösning Lös 140 g triklorättiksyra i cirka 750 ml vatten. Överför lösningen till en 1000 ml mätkolv, späd till vatten med vatten och blanda noggrant.

Provberedning Lös upp en mängd av provet i acetatbuffertlösningen för att producera en lösning som innehåller, i varje ml, mellan 9 och 22 HUT. (En sådan koncentration ger en absorbansavläsning, i proceduren nedan, inom det föredragna intervallet 0,2 till 0,5.)


Förfarande för syraproteas
Pipettera 10,0 ml av substratlösningen i var och en av en serie 25- × 150 mm provrör: en för varje enzymtest och en för substratämnet. Värm rören i ett vattenbad vid 40 ° i ca 5 min. Till varje rör, förutom substratämnet, tillsätt 2,0 ml av provberedningen och börja tajma reaktionen när ögonblicket tillsätts; tillsätt 2,0 ml acetatbuffertlösning till substratröret. Stäng rören med nr 4 gummiproppar och knacka försiktigt på varje rör i 30 sekunder mot handflatan för att blanda. Värm upp varje rör i ett vattenbad vid 40 ° i exakt 30 minuter och pipettera sedan snabbt 10,0 ml av triklorättiksyra-lösningen i varje rör. Skaka varje rör kraftigt mot proppen i cirka 40 s och låt sedan svalna till rumstemperatur i 1 timme, skaka varje rör mot proppen med 10 till 12 minuters intervall under denna period. Bered enzymämnen enligt följande: Värm i separata rör 10,0 ml av substratlösningen och cirka 5 ml av provberedningen i vattenbadet i 30 minuter, tillsätt sedan 10,0 ml av triklorättiksyra-lösningen till substratlösningen, skaka väl under 40 s och tillsätt 2,0 ml av den förvärmda provberedningen till denna blandning. Skaka igen och svalna vid rumstemperatur i 1 timme, skaka med mellanrum på 10 till 12 minuter.
Vid slutet av en timme skakar du varje rör kraftigt och filtrerar genom 11 cm Whatman nr. 42 eller motsvarande filterpapper och filtrerar den första halvan av filtratet genom samma papper. Bestäm absorbansen för varje filtrat i en 1 cm-cell, vid 275 nm, med en lämplig spektrofotometer, med hjälp av filtratet från substratämnet för att ställa in instrumentet till noll. Korrigera varje avläsning genom att subtrahera lämplig enzymavläsning och registrera det så erhållna värdet som AU.
[Obs: Om en korrigerad absorbansavläsning mellan 0,2 och 0,5 inte uppnås, upprepa testet med mer eller mindre av enzympreparatet vid behov.]

Standardkurvaöverföring 100,0 mg L-tyrosin, kromatografisk kvalitet eller motsvarande (Aldrich Chemical Co.), som tidigare torkats till konstant vikt, till en 1000 ml mätkolv. Lös upp i 60 ml 0,1 N saltsyra. När L-tyrosenen är helt upplöst, späd lösningen till volym med vatten och blanda noggrant. Denna lösning innehåller 100 µg tyrosin i 1,0 ml. Förbered ytterligare tre spädningar från denna stamlösning så att den innehåller 75,0, 50,0 och 25,0 µg tyrosin per ml. Bestäm absorbansen för de fyra lösningarna vid 275 nm i en 1 cm cell på en lämplig spektrofotometer kontra 0,006 N saltsyra. Förbered en plot av absorbans kontra tyrosinkoncentration. Bestäm kurvens lutning i termer av absorbans per µg tyrosin. Multiplicera detta värde med 1,10 och spela in det som AS. Ett värde på cirka 0,0084 bör erhållas.


Beräkning av syraproteas
En HUT-enhet av proteolytisk (syraproteas) aktivitet definieras som den mängd enzym som under 1 minut under de angivna betingelserna producerar ett hydrolysat vars absorbans vid 275 nm är densamma som för en lösning innehållande 1,10 µg / ml tyrosin i 0,006 N saltsyra.
Beräkna HUT per g av det ursprungliga enzympreparatet med ekvationen

HUT / g = (AU / AS) × (22 / 30W)

i vilken 22 är den slutliga volymen av testlösningen; 30 är reaktionstiden i min; och W är vikten, i g, av det ursprungliga provet.

[Obs: Värdet för AS, under noggrant kontrollerade och standardiserade förhållanden, är 0,0084; detta värde kan användas för rutinarbete i stället för det värde som erhålls från standardkurvan, men det exakta värdet som beräknats från standardkurvan bör användas för mer exakta resultat och i fall av tvivel.]


ANVÄNDARCERTIFIKAT


produktnamn Syraproteas    
Annat namn Ej tillämpligt Ursprungsland Kina
Anstränga Aspergillus oryzae Tillverkningsdatum 13 MAJ 2019
Partinummer SP19050903 Utgångsdatum 12 MAJ 2021
Paket 25 kg / hink Kvantitet 100 kg
PROTOKOLL SPECIFIKATIONER RESULTAT METOD
FYSISK & KEMISK ANALYS
Beskrivning brunt pulver Uppfyller Visuell
Lukt & smak Karaktäristisk lukt och smak Uppfyller Smak
Fukt NMT 7% 5,1% Fuktanalysator
IDENTIFIERING
Identifierbar aktivitet Positivt för Bromelain-aktivitet Uppfyller Internt
AKTIVITET
Proteasaktivitet NLT 500 000 HUT / g 508 270 HUT / g FCC VII
MIKROBIOLOGISK
Totalt antal bakterier
Koliforma bakterier (CFU / g)
Formar och jäst
E coli
Salmonella
Staphylococcus aureus
Pseudomonas aeruginosa
NMT 3000 CFU / g
NMT 30 CFU / g
NMT 100 CFU / g
Frånvarande
Frånvarande
Frånvarande
Frånvarande
500 CFU / g
10 CFU / g
10 CFU / g
Inte upptäckt
Inte upptäckt
Inte upptäckt
Inte upptäckt
FDA BAM Online Ch.3
FDA BAM Online Ch.4
FDA BAM Online Ch. 2
FDA BAM Online Ch.4
FDA BAM Online Ch.5
FDA BAM Online Ch.12
AOAC
TUNGMETALLER
Leda
Kvicksilver
Kadmium
Arsenik
NMT 3 ppm
NMT 0,1 ppm
NMT 1 ppm
NMT 1 ppm
0,21 ppm
0,1 ppm
11 ppm
11ppm
USP <231>
USP <231>
USP <231>
USP <231>
Förvaring: Förvara på sval och torr plats skyddad från ljus, håll trumman nära när den inte används.
Slutsats: Uppfyller IU-standarder.
Hållbarhet: Hållbarhet för Acid Protease under föreskrivna lagringsförhållanden och lufttät förpackning är 2 år.
Produkten ÖVERENSSTÄMMER ovanstående specifikationer
Godkänd av RICKY H. ZHU auktoriserad signatär
*The above information is a direct translation of the information provided to Newgen Biotech from the manufacturer of syraproteas. This Certificate of Analysis should be used for informational purposes and is not intended as a substitute for strict quality control analysis by the purchaser of this product.

Förpackning och förvaring

Förpackningspåse för fast mat, 25 kg / fat.


Syraproteas bör förvaras på torra, svala och väl ventilerade platser borta från solen, värmen.

Betalning:T / T, Paypal, Western Union, Alibaba Trade Assurance, VISA, MasterCard, e-Checking, Pay Later, LC och etc.

Heta etiketter: Syraproteas, tillverkare, leverantörer, grossist, köp, fabrik, anpassad, i lager, bulk, gratisprov, varumärken, Kina, tillverkad i Kina, billig, rabatt, lågt pris, köp rabatt, pris, prislista, offert, GMP, Kvalitet, senaste försäljning, två års hållbarhet

relaterade kategori

skicka förfrågan

Vänligen gärna ge din förfrågan i formuläret nedan. Vi kommer att svara dig om 24 timmar.